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 mice로부터 monocyte 추출

  mice로부터 monocyte 추출

  1. 경추탈골 후 털 날림을 방지하기 위해서 알코올로 충분히 적셔준다.
  2. 뒷다리 근처 복부를 Y자로 잘라주고 대퇴부와 엉치 뼈 사이, 발목을 자른다.
  3. 피부를 벗겨내고 무릎 연골도 잘라준다. 
  4. 근육을 제거하고 대퇴골만 사용한다.
  5. 대퇴골 양 끝을 잘라주고 1ml 주사기로 양 쪽을 통과시켜 구멍을 낸다. 
  6. media로 양쪽 번갈아 가면서 2~3번씩 뿌린다.
  7. Cell이 가라앉는 것을 방지하기 위해서 10~20번 pipetting 해준다.
  8. Filtering 하여 Conical tube로 이동하여 1200rpm에서 5min, 상온
  9. 4ml ACK Solution을 넣어주고 tapping하여 적혈구제거 (적색이 사라짐)
  10. Media 첨가후 centrifuge 1200rpm, 3min
  11. Media와 Growth factor 첨가후 Φ100 dish에 깔아준다.
  12. 2시간 이후 붙으면 washing 하고 media 교체

http://www.youtube.com/watch?v=Dnvq_wMZ2fI

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