Biobambooforest

  RIPA  lysis Materials RIPA buffer:  50  mM   Tris-HCl  (pH 7.5), 1% NP-40 , 0.25% Na- deoxycholate ,  100  mM   NaCl , 1  mM  EDTA, protease inhibitor Procedure 1.  Cell harvest (scraping or  trypsin -EDTA) and centrifuge at 3000 rpm for 5 min  at 4 o C. 2. Cell washing once with 1 ml PBS and centrifuge again.  3. Add RIPA lysis buffer  (200-300  μ l  for 6 well  scales ) and incubate in ice for 30 min  (rocking or vortex every 10 min). 4. Centrifuge at 13000 rpm for 30 min at  4 o C.  5. Take supernatant and use it for further analysis.