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PEI Transfection

  1. PEI Stock  만드는   법 1) 1mg/ml  되도록  PEI 를   DNase ,  RNase  Free-DW 로   녹인다 2) Water bath 80 도에서  2 시간   가열하여   완전히   녹임 3) pH9 정도   되는   것을  1M HCL 로  pH6.7 로   맞춤 4) 0.22microM syringe filter 로  filtering 5) aliquot 해서  -70 도에   보관 6)  한번녹인것은재사용하지않음 2. PEI 로  transfection 하는   경우 만들어져   있는  PEI stock 을   녹인   후 잘   흔들어   준   뒤 cell 에  transfection  할  plasmid DNA  총   량  ( micogram ) 에   곱하기  6 만큼  PEI 를   넣어준다 1) transfection 할  plasmid DNA  튜브에   넣어준다 2)  SerumFree  DMEM  을  transfection 할  dish 에   넣어준  medium 볼륨의  1/10 만큼   넣어준다 3) PEI 를  DNA  총량의  *6  만큼   넣는다 4)  잘   섞어   준   뒤 ...